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품목별 규격 및 기준
> 천연첨가물
> 글루코만난
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| 정의 |
이 품목은 천남성과 곤약(Amorphophallus konja)의 뿌리줄기에 함유된 다당류로 이소프로필알콜로 정제하고 분쇄한 것으로 포도당 및 만노스로 구성된 혼합물이다.
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| [성분규격] |
| 함량 |
이 품목은 건조물로서 글루코만난 90.0% 이상을 함유한다. |
| 성상 |
이 품목은 백∼엷은 황색의 분말이다. |
| 확인시험 |
(1) 이 품목 6g을 500ml 비이커에 넣고 이소프로필알콜 10ml로 적신 다음 즉시 교반하면서 물 200ml를 가하고 잘 교반한 후 1시간 방치하면 팽윤하여 점조한 용액이 된다.
(2) (1)의 점조한 액에 5% 수산화칼슘용액 200ml를 가하여 잘 혼합한 다음 방치하면 겔이 형성된다. |
| 순도시험 |
(1) 비 소：이 품목 0.25g을 백금제, 석영제 또는 자제도가니에 취하여 질산마그네슘의 에틸알콜용액(1→50) 10ml를 넣고 에틸알콜에 점화하여 연소시킨 다음 서서히 가열하여 450∼550°로 회화한다. 만일 탄화물이 존재하면 소량의 질산으로 적신다음 다시 강열하고 450∼550°로 회화한다. 식힌 다음 잔류물에 염산 3ml를 가하여 수욕상에서 가온하여 녹인 것을 시험용액으로 하여 비소시험을 할 때, 이에 적합하여야 한다(4ppm 이하).
(2) 납：이 품목 5.0g을 취하여 원자흡광광도법 또는 유도결합플라즈마발광광도법에 따라 시험할 때, 그 양은 2.0ppm 이하이어야 한다.
(3) 이소프로필알콜：이 품목은 5g을 정밀히 달아 목의 크기가 24/40의 1,000ml의 환저플라스크에 넣고 이에 항기포제(Dow-Corning G-10 또는 이와 동등한 것) 1ml, 물 200ml를 가해준 다음 1시간 동안 교반하여 준다. 이어서 이에 400mm의 환류냉각기, 증류두 및 수기를 부착시키고 기포가 수기에 들어가지 않도록 조절하고 증류액을 약 95ml정도 받고, 내부표준용액 4ml를 가한 다음 물을 가하여 100ml로 한 것을 시험용액으로 한다. 시험용액과 혼합표준용액 각각 일정량을 가스크로마토그라프에 주입하고, 다음 식에 따라 이소프로필알콜의 양을 구할 때, 그 양은 500ppm 이하이어야 한다. 다만, 반응계수 f는 혼합표준용액중의 이소프로필알콜 피크면적과 tert-부틸알콜 피크면적비인 AIPA/ATBA에 의하여 구한다.
aIPA x 4,000
이소프로필알콜의 함량(ppm) = ━━━━━━━━━━━━━━━━━
f x aTBA x 검체의 채취량(g)
aIPA：시험용액중의 이소프로필알콜 피크면적
aTBA：시험용액중의 tert 부틸알콜 피크면적
o 조작조건
칼 럼：3.2mm × 1.8m의 스테인레스관
칼럼충전제：80∼100메쉬의 Porapak QS(또는 이와 동등한 것)
검 출 기：수소염이온화 검출기(FID)
주입구온도：200°
칼 럼 온 도：165°
검출기온도：200°
캐리어가스 및 유량：질소, 이소프로필알콜이 2분, tert-부틸알콜이 3분에 검출되도록 유량을
조절한다.
O 시 액
혼합표준용액：IPA표준용액 4ml와 TBA표준용액 4ml를 정확히 취하고 이에 물을 가하여 100ml로 한 것을 혼합표준용액으로 한다. 이 액 1ml는 이소프로필알콜과 tert 부틸알콜을 각각 약 40μg씩을 함유한다.
IPA표준용액：이소프로필알콜(크로마토그라피용) 약 500mg을 정밀히 달은 다음 물을 가하여 50ml로 하고 이 액 10ml를 취하여 물을 가하여 100ml로 한다.
TBA표준용액：tert-부틸알콜(크로마토그라피용) 약 500mg을 정밀히 달은 다음 물을 가하여 50ml로 하고 이 액 10ml를 취하여 물을 가하여 100ml로 한다.
(4) 점 도：이 품목 1% 수용액을 만들어 점도측정법중 제 2법 회전식 점도측정법에 따라 시험할 때, 500cps 이상이어야 한다.
(5) 살모넬라 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」 일반시험법의 미생물시험법 중 살모넬라에 따라 시험할 때, 음성(-)이어야 한다.
(6) 대장균 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」 일반시험법의 미생물시험법 중 대장균에 따라 시험할 때, 음성(-)이어야 한다.
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| 건조감량 |
이 품목을 105°에서 3시간 건조할 때, 그 감량은 15% 이하이어야 한다. |
| 회분 |
이 품목을 회분시험법에 따라 시험할 때, 그 양은 4% 이하이어야 한다. |
| 정량법 |
이 품목 0.5∼1.0g(필요한 경우는 에테르 등으로 탈지한다)씩 동일한 무게로 2개 달은 다음 2개의 400ml 비이커에 각각 취하고 각각에 인산완충액(pH 6.0) 50ml씩을 가해준다. 이 때 pH를 확인해 보고 필요한 경우 pH 6.0±0.2로 조절한다. 텀아밀용액0.1ml를 가해주고 알루미늄박을 뚜껑으로 한 후 끓는 수욕조에서 5분마다 흔들어 주며 30분간 가열한다. 이 때 온도계를 사용하여 비이커의 내부온도를 85∼100°범위에서 15분간 유지시킨다. 이를 식힌 다음 0.275N 수산화나트륨용액 10ml를 가해주고 pH를 7.5±0.2로 조절한다.
프로테아제 5mg(또는 프로테아제 50mg을 물 1ml에 녹인액 0.1ml)을 가해주고 알루미늄박을 뚜껑으로 한 후 계속 흔들어주며 60°에서 30분간 항온시킨다. 다시 이를 식힌 후 이에 0.325M 염산 10ml를 가하여 pH를 4.0∼4.6으로 조절한 다음 아밀로글루코시다아제 0.3ml를 가해주고 알루미늄박을 뚜껑으로 한 후 계속 흔들어 주면서 60°에서 30분간 항온시킨다. 95% 알콜 280ml를 60°로 가온하여 가한 후 잘 흔들어 혼합한 다음 상온에서 1시간 방치하여 글루코만난을 침전시킨다. 미리 무게를 달아둔 셀라이트가 함유된 유리여과기에 78% 알콜을 가하여 적시고 셀라이트를 고르게 한 다음 흡인여과하여 셀라이트를 고르게 해주고 계속 흡인여과하며 효소처리한 검액을 이에 옮겨 여과한다.
잔사는 78% 알콜 20ml씩 3회, 95% 알콜 20ml씩 2회, 그리고 아세톤 10ml씩 2회 사용하여 차례로 세척한다. 피막이 형성된 경우 시약스푼으로 피막을 파괴하여 여과를 용이하게 해주고, 여과도중 간간히 여과를 중단하면 시간을 단축시킬 수 있다. 여과기는 105±5°에서 하룻밤 건조한 다음 데시케이타에서 식히고 평량한 후에 여과기의 무게를 뺀 값을 잔사의 무게로 한다. 1개의 여과기 잔류물에 대해서는 단백질량을 구한다(단백질 계수：6.25). 또 다른 여과기 잔류물은 525°에서 5시간 회화시켜 회분량을 구한다. 따로, 검체를 제외한 공시험을 행하고 다음 식에 따라 글루코만난의 함량을 구한다.
공시험값 B(mg) ＝ 공시험 평균잔사무게(mg) - PB - AB
PB：공시험 단백질량(mg)
AB：공시험 회분량(mg)
[검체의 평균 잔사무게(mg) - P - A - B]
함량(%) ＝ ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ × 100
검체의 평균무게(mg)
P：단백질량(mg)
A：회분량(mg)
B：공시험값(mg)
o 시약 및 시액
인산완충액(pH 6.0)：인산이나트륨(무수) 1.4g 및 인산일나트륨(1수화물) 9.68g을 취하여 물 700ml에 녹인 후 물을 가하여 1,000ml로 한다.
0.275N 수산화나트륨용액：수산화나트륨 11g을 물 700ml에 녹인 후 물을 가하여 1,000ml로 한다.
0.325M 염산：0.1M 염산 325ml를 취한 다음 물을 가하여 1,000ml로 한다.
텀아밀(Termamyl, 내열성알파아밀라아제)용액：Novo사 No. 120 L(냉장보존)
프로테아제：Sigma사 No. P 3910(냉장보존)
아밀로글루코시다아제：Sigma사 No. A 9913(냉장보존)
셀라이트 C 211(Fischer사)：산용액 세척 |
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